高致病性繁殖与呼吸综合征病毒TJ株致弱过程中遗传变异和致病性分析
冷雪1，李真光1，李西玉2，王凤雪1，张秀华1，武华1,2*
（1.中国农业科学院 特产研究所，吉林 132109；2.华威特（北京）生物科技有限公司，北京 100085）
摘要：为了研制高致病性猪繁殖与呼吸综合征（HP-PRRS）弱毒疫苗，将高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（HP-PRRSV）TJ株进行了致弱驯化，在Marc-145细胞上对其进行了连续传代，每5-10代进行噬斑克隆纯化病毒。对致弱过程中不同代次病毒进行遗传变异及致病性分析。结果表明，TJ株在致弱过程中各基因均存在不同程度的变异，至第140代，共有58个氨基酸发生突变，同时在非结构蛋白nsp2区域，在不连续的30个氨基酸缺失（481位和533-561位）之后又出现连续120个氨基酸的缺失，与VR-2332相比，该缺失位点位于推定氨基酸序列的628-747位。动物接种试验结果表明，TJ株经Marc-145细胞传至第20代时，病毒对猪的致病性明显减弱，推测TJ株在这一传代过程中非结构蛋白nsp2-nsp5、nsp7和结构蛋白GP5所发生的遗传变异对病毒毒力致弱起到一定作用。
关键词：HP-PRRSV；TJ株；缺失；致弱；遗传变异
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