水貂出血性肺炎

顾沪，陈超阳，孟相秋，赵建增
华威特（江苏）生物制药有限公司

    水貂出血性肺炎主要由铜绿假单胞菌（原称绿脓杆菌）、肺炎克雷伯氏菌、及肺炎双球菌、大肠杆菌等单独或多种细菌混合感染引起的水貂呼吸道传染病。该病发病急、病程2～3天，很快死亡，常呈地方性暴发流行。夏秋两季，尤其是在7~9月份的水貂换毛期多发。水貂不分品种、年龄及性别均可感染本病，发病率和死亡率均在10％~50％。在我国，绿脓杆菌和肺炎克雷伯氏菌是导致出血性肺炎的主要病原，分别有50％及20％以上的病例与此二者有关，且常见两者混合感染。

    一、病原体

    绿脓杆菌作为一种条件致病菌，存在于正常健康动物的机体内，饲养管理不当及环境卫生不良均可诱发本病；当机体受到应激或免疫力功能下降时，细菌就有机会感染机体。我国于1983年首次报道过该病原菌引起的水貂出血性肺炎，随着我国水貂养殖业的发展，该病的爆发也越来越频繁。2000-2014年，山东、吉林、辽宁、河北等省的各大养殖场均发生过由绿脓杆菌引起的出血性肺炎。采用日本生研血清分型系统，绿脓杆菌共分14种血清型（A~N型），流行病学调查显示，我国的主要流行血清型为G型，约90％左右的感染与本型有关。其次是B型和C型，感染率分别为10%和2%左右。

    水貂肺炎克雷伯氏菌也是一种典型的条件致病菌，该菌普遍存在于自然界中，如水、土壤、空气以及饲喂的食物中。过去人们认为该菌对畜禽的危害不大，一直没有引起足够的重视，但近几年来肺炎克雷伯氏菌不仅对畜禽的危害越来越严重，引起毛皮动物（水貂、狐狸、貉子）的发病率也呈上升趋势，已成为引发出血性肺炎的重要病原体，特别是与绿脓杆菌的混合感染。赵纯德等在1987年首次报道了舟山市两个貂场发生了肺炎克雷伯氏菌，此后国内陆续出现肺炎克雷伯氏菌引起毛皮动物发病的报道：2009年山东省海阳市某养貂场水貂发病并死亡，经确诊由肺炎克雷伯氏菌导致；2013年山东诸城市某水貂养殖场共饲养水貂1500只，部分水貂出现食欲下降，呼吸困难，口鼻流血的临床症状，6天内死亡100多只，经确诊为肺炎克雷伯氏菌和绿脓杆菌混合感染。2012年，本项目组从山东一水貂养殖场死亡水貂的肺脏内分离到一株肺炎克雷伯氏菌，动物回归试验证实该菌株可引起水貂出血性肺炎，进一步证实了这种细菌的致病性及它的广泛存在。

    二、诊断

    临床诊断：突然出现食欲急剧下降或废绝，精神沉郁，呼吸困难，腹式呼吸，就应怀疑本病。本病的病程短促，大部分发病后1~3天死亡，有的死前口吐血水，鼻腔流出血水。

    解剖病变：主要变现为肺脏病变，肺出血、充血、实变，有的有暗红色出血块，肺脏切面有血样液体渗出；肝脏肿大，有出血点。

    实验室诊断：

   （1）镜检：无菌取新鲜病死水貂肺脏涂片，革兰氏染色，镜检，可见大量革兰氏阴性杆菌。

   （2）细菌分离培养：用接种环无菌沾取病死水貂肺脏新鲜切面，划线接种于普通营养培养基平板，37℃培养24小时。绿脓杆菌在普通琼脂培养基平板上可见光滑、边缘平坦、中央隆起的中等大小的菌落，菌落周围培养基呈蓝绿色。肺炎克雷伯氏菌在普通琼脂培养基平板上形成乳白色、圆形、湿润的菌落，用接种环挑单菌落易形成拉丝。

   （3）生化鉴定：绿脓杆菌的氧化酶、明胶液化，硝酸盐产气试验为阳性，42℃生长。肺炎克雷伯氏菌的吲哚、MR、鸟氨酸脱羧酶试验为阴性，VP、柠檬酸盐、丙二酸钠、尿素酶、赖氨酸脱羧酶、ONPG试验为阳性。

    三、预防与控制

    在没有接种水貂出血性肺炎疫苗时，养殖场只能根据药敏试验情况，选择抗生素治疗疑似发病的水貂，但疗效不佳，不能起到预防作用。2015年我国研制出了水貂出血性肺炎二价灭活疫苗，主要针对由G型、B型绿脓杆菌引起的感染，有比较好的预防效果。但是对肺炎克雷伯氏菌感染仍缺少专门的疫苗。

    金天明利用分离到的鸡源克雷伯氏菌制备的灭活苗，免疫攻毒的保护率可达98.0％以上，免疫期达6个月；陈兴生利用分离的牛源肺炎克雷伯氏菌制备的甲醛氢氧化铝灭活苗，免疫后牛血清抗体可维持6个月，保护率为100％。这些结果提示，利用疫苗控制克雷伯氏菌是可行的，但目前关于毛皮动物肺炎克雷伯氏菌疫苗的研究尚属空白。

    近些年，水貂出血性肺炎的发生主要以二重感染和多重感染为主，所以，在一定程度上，免疫单苗不能够达到较好的预防效果，同时，多种单苗的共同使用会存在操作繁琐，免疫禁忌等问题。因此，联苗对预防由混合感染引发的水貂出血性肺炎有重要的意义。

    四、结语

    随着细菌的耐药性越来越严重，尤其是多重耐药菌株的出现，利用各类抗生素治疗细菌感染的效果将会越来越差，使治疗细菌感染成为了棘手问题。防重于治、治不如防，可以预见疫苗接种将成为解决由绿脓杆菌、肺炎克雷伯氏菌混合感染引起水貂出血性肺炎的最有效方法之一。