猪繁殖与呼吸综合征病毒经典毒株、高致病性毒株与疫苗毒株TJM-F92的RT-PCR鉴别检测方法的建立

王宇菲^1,2陈超阳²王鑫²夏铭崎²武华^2*
（1 沈阳化工大学制药与生物工程学院，辽宁沈阳 110142）
（2华威特(北京)生物科技有限公司，北京 100085）

摘要：根据Gen Bank中公布的经典猪繁殖与呼吸综合征病毒（LP-PRRSV）、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（HP-PRRSV）以及高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒株（HP-PRRSV TJM F92）的Nsp2核苷酸序列，设计两对特异性引物（1st、2nd），以建立鉴别LP-PRRSV、HP-PRRSV与HP-PRRSV TJM F92的RT-PCR检测方法。用引物1st对LP-PRRSV、HP-PRRSV与HP-PRRSV TJM F92进行RT-PCR扩增，分别扩增出587bp、497bp、497bp的特异性片段；用引物2nd对HP-PRRSV与HP-PRRSV TJM F92进行RT-PCR扩增，分别扩增出1004bp、644bp的特异性片段，结合两种扩增结果可达到区分三者的目的；对RT-PCR的特异性、敏感性、重复性进行评价，结果表明建立的RT-PCR检测方法具有特异性强、敏感性高、重复性好的特点，可用于LP-PRRSV、HP-PRRSV与HP-PRRSV TJM F92的鉴别诊断。

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