利用SUMO表达系统高效表达猪O型口蹄疫病毒VP0、VP1、VP3 基因
宋妮1，温永俊1，王凤雪1，武华1,2
(1.中国农业科学院特产研究所，特种经济动物分子生物学国家重点实验室，吉林长春 130112;
2.华威特( 北京) 生物科技有限公司，北京 100085)
摘要: 根据 GenBank 中公布的猪O型口蹄疫病毒( foot and mouth disease virus，FMDV) 全基因合成了FMDV结构蛋白前体蛋白P1基因，同时设计了扩增 FMDV 结构蛋白VP0、VP1和VP3基因的引物。以 P1 基因为模板，分别经 PCR 扩增获得FM-DV VP0、VP1和VP3基因。扩增产物克隆于Blunt载体中，酶切后将目的片段连接到原核表达载体SUMO中，构建重组表达质粒SUMO-VP0、SUMO-VP1和 SUMO-VP3，将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS进行诱导表达。经SDS-PAGE电泳可见融合蛋白均获得高效表达，融合蛋白表观分子质量分别约为55、48和40ku。在IPTG浓度为1.0mmol /L，温度为37℃，诱导5h时融合蛋白表达量最大。Western blotting结果表明，融合蛋白均可被FMDV阳性血清识别，反应原性良好。
关键词:猪O型口蹄疫病毒;VP0、VP1、VP3基因;SUMO;高效表达
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